Инструкция по технологии работы организаций по искусственному осеменению и трансплантации эмбрионов сельскохозяйственных животных

  Искусственное осеменение сельскохозяйственных животных является важнейшими инструментом реализации селекционных программ.
  Ведущая роль в организации и проведении искусственного осеменения принадлежит федеральным государственным унитарным предприятиям по искусственному осеменению сельскохозяйственных животных.
  Это позволило не только расширить применение современных биотехнологических приемов в животноводстве, но и осуществлять государственные программы по комплексному совершенствованию продуктивных и технологических качеств сельскохозяйственных животных.
  Со времени последнего издания предлагаемой вашему вниманию Инструкции прошло почти 20 лет и, естественно, по ряду положений она утратила свое значение. В практике ведения животноводства появились новые, более совершенные технологии и приемы, оборудование, приборы и инструменты. Коллектив авторов, состоящий из ведущих ученых и практических работников в области биотехнологии, изложил в настоящем издании основные требования и методики по технологии работы организаций по искусственному осеменению сельскохозяйственных животных с учетом последних достижений отечественной и зарубежной науки и передовой практики.
Требования Инструкции являются обязательными при производстве спермы производителей и эмбрионов сельскохозяйственных животных.

Читать также: Искусственное осеменение крупного рогатого скота

Положение об организации по искусственному осеменению сельскохозяйственных животных

I. ОБЩЕЕ ПОЛОЖЕНИЕ

1.1. В соответствии со статьей 33 Федерального закона "О племенном животноводстве" организация по искусственному осеменению сельскохозяйственных животных содержит племенных животных-производителей, которые используются для получения спермы.
Организация по искусственному осеменению сельскохозяйственных животных создается по согласованию с Департаментом животноводства и племенного дела и Департаментом ветеринарии Минсельхоза России.
1.2. Лицензия на искусственное осеменение сельскохозяйственных животных выдается организации по искусственному осеменению на один вид животных.
1.3. Руководителем организации по искусственному осеменению сельскохозяйственных животных может быть только специалист, имеющий высшее зоотехническое или высшее ветеринарное образование (статья 33 Федерального закона "О племенном животноводс1ве").
1.4. Организация по искусственному осеменению сельскохозяйственных животных в своей деятельности руководствуется законодательством Российской Федерации, своим уставом и настоящим Положением, утвержденным приказом №28 Минсельхозпрода России от 4.02,1997 года.

2. ЦЕЛИ И ПРЕДМЕТ ДЕЯТЕЛЬНОСТИ

2.1. Получение, обработка и хранение спермы племенных производителей.
2.2. Контроль качества и сертификация спермы племенных производителей сельскохозяйственных животных.
2.3. Реализация сертифицированной спермы племенных производителей для проведения искусственного осеменения сельскохозяйственных животных.
2.4. Оказание услуг гражданам и юридическим лицам в организации искусственного осеменения животных проводится в соответствии с требованиями, изложенными в настоящей Инструкции.

3. ОСНОВНЫЕ ТРЕБОВАНИЯ К ОРГАНИЗАЦИЯМ ПО ИСКУССТВЕННОМУ ОСЕМЕНЕНИЮ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ ПРИ ЛИЦЕНЗИРОВАНИИ И ИНСПЕКЦИОННОМ КОНТРОЛЕ

3.1. Наличие племенных производителей сельскохозяйственных животных, племенная ценность которых подтверждена племенным свидетельством (сертификатом) и результатами иммуногеиетической экспертизы.
3.2. Соответствие применяемых технологий и племенного материала требованиям нормативных документов, утвержденных Департаментом животноводства и племенного дела и Департаментом ветеринарии Минсельхоза России.
3.3. Наличие персонала, прошедшего специальную подготовку, и регулярная его аттестация (допуск) на получение спермы и на искусственное осеменение сельскохозяйственных животных.
3.4. Обеспеченность специальным оборудованием, приборами, химическими и медицинскими препаратами, средами для хранения спермы, вычислительной и измерительной техникой, нормативной документацией по племенному животноводству.
3.5. Участие в деятельности информационной системы в области племенного животноводства. Регистрация технологических процессов и идентификация племенного материала (продукции), ведение, хранение первичных документов учета племенного материала (продукции), ведение банка данных о происхождении, воспроизводстве, оценке племенных производителей.
3.6. Изолированное содержание племенных производителей, указанных в лицензии, от животных других видов.
3.7. Наличие в организации по искусственному осеменению сельскохозяйственных животных лабораторий по биологическому и санитарному контролю качества продукции (спермы).
3.8. Соответствие условий содержания и кормления животных действующим зоотехническим и ветеринарно-санитарным нормам.

4. ОСНОВНЫЕ ФУНКЦИИ И ДЕЯТЕЛЬНОСТЬ ОРГАНИЗАЦИЙ ПО ИСКУССТВЕННОМУ ОСЕМЕНЕНИЮ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ

4.1. Получение, обработка, контроль качества, хранение и реализация спермы сельскохозяйственных животных в соответствии со стандартами, нормами и правилами племенного животноводства.
4.2. Ведение племенного учета по формам в соответствии с требованиями Департамента животноводства и племенного дела Минсельхоза России.
4.3. Соблюдение установленных зоотехнических, ветеринарно-санитарньк стандартов, норм и правил, обеспечивающих здоровье животных.
4.4. Соблюдение установленного порядка использования племенной продукции (спермы) животных в соответствии с законодательством Российской Федерации о селекционных достижениях.
4.5. Своевременное внесение в учредительные (регистрационные) документы изменений, вытекающих из деятельности в области племенного животноводства после получения лицензии.
4.6. Оказание содействия главным государственным инспекторам и привлекаемым ими экспертам в осуществлении государственного надзора за деятельностью организаций по племенному животноводству.

Размещение, постройка и оборудование организаций по искусственному осеменению крупного рогатого скота.

1. ОБЩИЕ ПОЛОЖЕНИЯ

При выборе места для организаций по искусственному осеменению и трансплантации эмбрионов животных необходимо руководствоваться следующими требованиями:
а) месторасположение организаций должно быть выбрано с учетом благополучия местности по инфекционным заболеваниям животных, рельефа, залегания грунтовых вод, господствующих ветров и возможностей удобного выхода на шоссейные и железнодорожные магистрали и расположено от транспортных магистралей, населенных пунктов и животноводческих объектов на расстояние, установленное по согласованию с местными органами Государственного санитарного и ветеринарного надзора;
б) размещение всех зданий и сооружений на территории организации для искусственного осеменения и трансплантации эмбрионов животных должно обеспечить их рациональную технологическую взаимосвязь и соблюдение необходимых ветеринарно-санитарных условий;
в) территория организации должна быть огорожена, а проезд и проход через неё посторонних лиц и транспорта должны быть запрещены;
г) на территории организации должны находиться только производственные здания, племенные производители, доноры и реципиенты эмбрионов сельскохозяйственных животных.

2. РАЗМЕЩЕНИЕ И ОБОРУДОВАНИЕ ОРГАНИЗАЦИИ
ПО ИСКУССТВЕННОМУ ОСЕМЕНЕНИЮ ЖИВОТНЫХ

2.1. При составлении генерального плана застройки территория организации по искусственному осеменению должна быть разделена на три зоны со следующими объектами:
Зона Л - строго изолированная. В ней размещают здания:
а) для содержания племенных производителей и ремонтного молодняка (с выгульными двориками);
б) лабораторно-технологический корпус;
в) карантинное помещение для хранения спермы в течение 30 дней;
г) ветеринарный пункт с комнатами для ветеринарных специалистов.
Зона А должна быть огорожена плотным высоким забором (2м) и защищена внутри зелеными насаждениями с густой кроной. Вход в зону А допускается только через зону Б после смены обуви и одежды в специальном помещении (санпропускнике), а въезд и выезд — через контрольные дезинфекционные пункты.
Зона Б - условно изолированная. В ней размещают производственные объекты, связывающие зону А с зоной В. Она должна быть огорожена забором (высота!,5 м), вход и въезд в неё допускается только через дезинфекционные ванны для транспорта и дезковрики для пешеходов.
На границе территорий зон А и Б располагают стационарные помещения для длительного хранения спермы производителей, изолятор с боксами, огороженный собственным забором. В зоне Б передают сперму для транспортировки в хозяйства.
Зона В - условно открытая, В ней размещают:
а) помещение для административно-управленческого персонала и специалистов организации;
б) транспортный цех;
в) центральную котельную и склад топлива;
г) помещение для обработки и дезинфекции сосудов Дьюара и другого оборудования, поступающего из хозяйств.

2.2. За забором организации по искусственному осеменению на удалении от животноводческих объектов не менее 250 метров размещают:
а) карантинный двор с постройками и погрузочно-разгрузочной площадкой для вновь поступающих в организацию производителей, который необходимо огородить и закрепить за ним отдельный обслуживающий персонал;
б) жилые дома для работников организации и жилищно-коммунальный отдел (на удалении 300-500 метров);
в) цех кормопроизводства с земельной площадью и средствами механизации;
г) культурно-бытовые учреждения, торговые предприятия и др.

2.3. Помещения (скотные дворы) для зимнего содержания производителей строят соответственно задачам организации.
Для летнего содержания производителей необходимо иметь загоны с легкими навесами, оборудованные кормушками и автопоилками, а для быков - кольцевые коридоры и другие приспособления для принудительного моциона.

2.4. Лабораторно-технологический корпус должен включать помещение для обработки производителей, манежи для взятия спермы, моечную, стерилизационную, стерильный бокс, лабораторию и карантинное хранилище спермы.

2.5. Ветеринарно-санитарный узел для купания (в теплое время года), сушки и санитарной подготовки быков к взятию спермы состоит из душевой и сушилки.
Душевая комната должна иметь асфальтовый пол с уклоном к сточным трапам, подводку горячей и холодной воды (либо специальный водонагреватель), подводку электроэнергии для пылесоса. Сушилка должна быть оборудована сушильными установками (типа калориферов) для обсушивания производителей.

2.6. Манежи для взятия спермы у производителей должны быть раздельные и иметь общую стену с моечной, стерильным боксом и лабораторией.
Площадь манежа на один станок должна быть для быков не менее 40-60 м2 (для механизированного станка), для баранов и хряков - не менее 10-20 м2 для жеребцов - 50 м2, высота манежа -4м.
Пол манежа должен иметь уклон для стока воды в канализационные трапы.
Покрытие пола - асфальтовое. В манеже леред станками для взятия спермы приклеивают специальной мастикой резино-битумные рифленые коврики. Если нет коврика, перед станками делают углубления на 5 см и размером 1,5х2,м, которые заполняют битумом.
Стены манежа облицовывают на высоту не менее 1,5 м от пола глазурованной керамической плиткой, а выше - стены и потолок красят масляной краской.
Для мытья пола и станков в манеже необходимо поддерживать температуру не ниже 18°С.
Для взятия спермы в манежах устанавливают станки и механические станки специальных конструкций.

2.7. Моечная комната служит для мытья всех приборов и посуды, используемых для взятия и обработки спермы. Пол выстилают метлахской плиткой и делают трапы для стока воды. Стены облицовывают глазурованной плиткой (на высоту не менее 1,5 м). Моечная должна иметь холодное и горячее водоснабжение, канализацию, электроэнергию для технических целей и желательно - газоснабжение.

2.8. Рядом с манежем или смежно с ним устраивают стерилизациониую комнату, где проводят обеззараживание искусственных вагин и посуды.
В стерилизационной комнате должен быть сушильный шкаф (на 130-200°С), электрический автоклав для стерилизации посуды, искусственных ватин, инструментов и других материалов.

2.9. Из стерилизационной комнаты искусственные вагины передают в третью .комнату (бокс), в которой установлены бактериологические термостаты для искусственных ватин (40...42°С), Искусственные вагины берут из термостата, надевают стерильный спермоприемннк: и передают через -бактерицидный шлюз-окно техникам по взятию спермы.

2.10. Лабораторию для исследования и первичной технологической обработки спермы размещают в светлой и чистой комнате, пол которой покрывают линолеумом, а стены облицовывают (на уровне не менее 1,5 м) светлой глазурованной плиткой, а выше - красят светлой масляной краской.
Лаборатория должна быть оборудована лабораторной мебелью и необходимым, оборудованием для технологической обработки спермы в соответствии с ветеринарно-санитарными правилами. Она должна иметь широкое обзорное окно, через которое контролируют процесс взятия, спермы и бактерицидный шлюз для передачи спермоприемника со.спермой.

2.11. Лаборатория должна быть оборудована надежной приточно-вытяжнойили принудительной вентиляцией.

2.12. Для замораживания спермы должна быть оборудована специальная лаборатория. Вентиляция этой лаборатории должна обеспечивать быстрое удаление газообразного азота из Помещения-2,13- Карантинное помещение для хранения замороженной спермы в течение. 30 дней размещают в просторной светлой комнате с хорошей вентиляцией, где устанавливают специальные емкости-хранилища.

2.14. Помещение для длительного хранения спермы должно быть оборудовано в соответствии с ветеринарно-санитарными требованиями и иметь надежную приточно-вытяжную или принудительную вентиляцию. В помещении располагаются стационарные хранилища.

2.15. Экспедиционное помещение (между зонами А и Б) служит для вьвдачн спермы из закрытых помещений зоны А. В это помещение передают из хранилища сперму для отправки в хозяйства. В экспедиционном помещении оформляют документы па отпускаемую сперму.

2.16. Административные помещения организации по искусственному осеменению животных являются общедоступными (без специального санитарного режима).

3. РАЗМЕЩЕНИЕ И ОБОРУДОВАНИЕ ОРГАНИЗАЦИЙ ПО ТРАНСПЛАНТАЦИИ ЭМБРИОНОВ ЖИВОТНЫХ

Организация (центр) по трансплантации эмбрионов относится к объектам закрытого типа, поэтому ее территория должна быть огорожена, а допуск посторонних лиц и транспорта на неё запрещен.
3.1. Для поступающих в центр животных предусматривается карантинный скотный двор за пределами территории центра на расстоянии не менее 250 м, который должен иметь ограждение и отдельный обслуживающий персонал.
3.2. Территория центра должна иметь разделение на три зоны А, Б и В.
Зона А - строго изолированная. В ней располагаются лабораторно-технологический корпус для получения, обработки и хранения эмбрионов и помещения для содержания доноров и реципиентов (с выгульными двориками).
Зона Б - условно изолированная. В зоне Б находятся помещения для кормоприготовления и хранения кормов.
Зона В - условно-открытая. Здесь находятся помещения хозяйственно-бытового назначения: административный корпус, транспортный цех, котельная.
3.3. За забором организации по трансплантации эмбрионов на удалении от животноводческих объектов не менее 250 метров размещают карантинный двор с постройками и погрузочно-разгрузочной площадкой для вновь поступающих в организацию доноров и реципиентов, который необходимо огородить и закрепить за животными отдельный обслуживающий персонал.
3.4. Лабораторно-технологический корпус центра трансплантации эмбрионов должен иметь помещение для санитарной обработки животных, манеж для извлечения эмбрионов, лабораторию для первичной обработки и культивирования эмбрионов, лабораторию для замораживания эмбрионов, хранилище для эмбрионов, комнату для персонала и санузел.
3.5. Пол манежа должен иметь уклон для стока воды в канализационные трапы, покрытие пола - асфальтовое. Панели стен помещений до 1,5-1,8 м от пола выкладывают глазурованной керамической плиткой. Стены и потолки выше панелей окрашивают масляной краской светлых тонов.
3.6. В лабораторно-технологическом корпусе необходимо холодное и горячее водоснабжение. Все помещения отапливают в холодное время года.
3.7. Лабораторно-технрлогический корпус должен быть оборудован в соответствии с ветеринарно-санитарными правилами. В помещении для хранения эмбрионов должна быть предусмотрена вытяжная вентиляция.
3.8. Скотный двор центра трансплантации должен иметь скотоместа с привязью для коров-доноров и реципиентов. Размер стойла для коров - 220х120 см, для телок-реципиентов -180х95 см.
3.9. Пункт трансплантации эмбрионов в хозяйстве следует располагать в непосредственной близости от помещений для содержания животных, используемых в качестве доноров и реципиентов. Его можно строить и в блоке с животноводческими помещениями.

Содержание и использование племенных производителей

1. Содержать и использовать племенных производителей необходимо так, чтобы при поддержании высокой половой активности получить от них максимальное количество высококачественной спермы и продлить срок племенного использования.
Нельзя допускать стойлового содержания производителей без активного моциона, так как это ведет к снижению их половой активности, ухудшению качества спермы, проявлению онанизма, ослаблению и заболеваниям конечностей, а также к снижению сопротивляемости организма.
2. Помещения для содержания производителей должны удовлетворять установленным зоогигионическим и ветерииарно-санитарным требованиям. Во избежание простудных заболеваний производителен предохраняют от сквозняков.

1. СОДЕРЖАНИЕ БЫКОВ

1.1. Для содержания племенных быков в помещениях устраивают денники и стойла.
Помещения для содержания быков должны быть свободными, без нагромождений и глухих перегородок, сухие, светлые, хорошо вентилируемые, с деревянными полами. Длина стойла -2,5 м, ширина- 1,8-2 м.
Привязывают быков цепной привязью за щею, на которую надевается толстый ременный ошейник. Привязь достаточно свободная, чтобы не мешать животному ложиться. В денниках животные находятся без привязи.
1.2. Летом быков содержат на свежем воздухе в летних лагерях либо на пастбищах на длинной цепи. В этом случае используются сменные пастбища те расчета 0,3 га на взрослого быка.
1.3. Важнейшим условием сохранения здоровья и воспроизводительной способности производителя является ежедневный активный моцион. Для этих целей используют кольцевые коридоры с периметром (20-150 м (на 40-50 быков).
Наибольший эффект от прогулок получают при условии, если быки находятся в кольцевом коридоре от 40 до 60 минут непосредственно перед взятием спермы, при этом в первых эякулятах объем и концентрация сперматозоидов повышается в среднем, на 10-20%.
1.4. Кроме моциона быкам предоставляются прогулки летом - на пастбище, зимой - в специальных загонах.
1.5. При использовании производителей следует внимательно следить за состоянием их здоровья, упитанностью и качеством спермы. Особенно важно при этом соблюдать распорядок дня, малейшие нарушения которого ухудшают половую активность а качество спермы.
1.6. Кормление быков и уход за ними в организациях по искусственному осеменению сельскохозяйственных животных проводят по следующему примерному распорядку дня:
- 6 час. - 6 час, 10 мин. - прием быков от ночного скотника;
- 6 час. 10 мин. - 6 час. 30 мин- - уборка скотомест;
- 6 час. 30 мин. - 7 час. - скармливание 20% сена рациона;
- 7 час. - 7 час. 30 мин. - скармливание 25% концкормов рациона;
- 7 час. 30 мин. - 8 час. 30 мин. - чистка быков перед взятием спермы;
- 8 час. 30 мин- - 9 час. - подготовка быков к взятию спермы;
- 9 час. - 10 час. 30 мин. - взятие спермы от быков;
- 10 час. 30 мин. - 12 час. - моцион быков;
- 12 час. - 13 чае. 30 мин. - скармливание быкам 50% концкормов и 40% сена рациона;
- 13 час. 30 мин.-13 час. 50 мин. - заготовка сена для вечернего скармливания;
- 13 час. 50 мин. -14 час- - передача быков дежурному скотнику;
- 14 час. - 22 час. - работа дежурного скотника;
- 17 час. - 18 час. - скармливание быкам 40% сена рациона;
- 22 час. - б час. - дежурство ночного скотника. Составляя распорядок дня необходимо помнить, что брать сперму разрешается не ранее, чем через 2 часа после кормления и водопоя. Моцион (неутомительный) должен предшествовать взятию спермы. Животных необходимо ежедневно чистить, для каждого производителя следует иметь отдельную волосяную щетку с написанной на ней кличкой или номером. Копыта расчищают и обрезают по мере их отрастания.
1.7. Всем быкам с 9-месячного возраста вставляют носовые кольца. Водить производителя следует в недоуздке при помощи палки-водила длиною около 2 м с карабином, управляемым с рукоятки палки, который цепляют за носовое кольцо. Носовое кольцо подтягивают налобным ремнем, чтобы оно не мешало поедать корм. Нельзя привязывать животных за носовое кольцо.
1.8. Выработку половых рефлексов у быков следует начинать с 9-10 месячного возраста. Использовать быков начинаю как правило, с 12 месячного возраста. До 18 месяцев берут два эякулята один раз в неделю. С 18 месячного возраста быков переводят в основное стадо и до 3 лет у них берут сперму 3 раза в две недели - дуплетом. Производителей старше 3 лет используют раза в 2 недели и берут сперму триплетом. Промежуток межа взятиями спермы должен быть не менее 10 минут. После взята первого эжулята быка водят по кругу в течение 12-15 минут. При определении режима использования быка необходимо учитывать его физиологическое состояние, породу, темперамент и потребность в спермопродукции.

2. СОДЕРЖАНИЕ БАРАНОВ

2.1. Баранов зимой содержат в чистых и сухих групповых станках по 5-6 голов и более на площади из расчета не менее 2 м на каждого производителя. Весь световой день, а в хорошую погоду в течение суток бараны должны находиться в достаточно просторных сухих базах, и только в ненастную погоду, особенно на ночь, их следует загонять в помещение. Длительное пребывание баранов на свежем воздухе способствует улучшению обмена веществ и получению высокой шерстной продуктивности.
На естественных и сеяных травах в летние жаркие дни баранов пасут рано утром и вечером. Для содержания баранов в жаркое время строят теневые навесы вблизи кормовых угодий на более возвышенных и обдуваемых ветром местах. Целесообразно делать навесы разборными, чтобы можно было легко перенести их на другой пастбищный участок.
2.2. Баранов оберегают от загрязнения дорожной пылью, цепкими и колючими плодами растений (дурнишник, репей, ковыль и др.). Регулярно расчищают копыта, подстригают шерсть, около глаз и загрязненную шерсть на мошонке за 2 месяца до использования.
2.3. За 45 дней до начала случного сезона племенных баранов приучают к взятию спермы. Отобранные бараны-производители к началу осеменения овцематок должны давать эякуляты объемом 1-1,5 мл с оценкой спермы не ниже Г-8. Неактивных баранов выделяют в отдельную группу и улучшают им условия кормления и содержания. Для активизации половых рефлексов к таким баранам наряду с матками подпускают энергичных баранов-пробников с подвязанными фартуками, а при половом возбуждении малоактивным баранам дают возможность сделать садку на овцу. Пробников в это время следует удалить
2.4. Примерный распорядок дня в стойловый период;
- 6 час. - 9 час. - водопой, дача концентрированных и сочных кормов, сена;
- 9 час. - 10 час. взятие спермы;
- 10 час. - 11 час. - прогулка, отдых;
- 11 час- - 13 час. - водопой, дача концентрированных и сочных кормов и сена;
- 13 час. -16 час. - прогулка, отдых;
- 16 час. -18 час. - дача концентрированных кормов и сена.
2.5. В период проведения искусственного осеменения овец барану при хорошей подготовке и в зависимости от индивидуальных особенностей можно давать до 4 садок в день.
Примерный распорядок дня в период проведения осеменения:
- 4 час. - 5 час. - водопой, кормление концентрированными, сочными кормами и кормами животного происхождения;
- 5 час. - 7 час. - утренняя пастьба;
- 7 час. - 10 час. - взятие спермы;
- 10 час. - 11 час. 30 мин. - кормление сочными и концентрированными кормами;
- 11 час. 30 мин, - 15 час. - дневной отдых;
- 15 час- -17 час. - водопой и пастьба;
- 17 час. - 18 час. 30 мин. - взятие спермы;
- 18 час. 30 мин. - 19 час. - кормление концентрированными кормами;
- 19 час. -20 час. - кормление грубыми кормами;
- 20 час. - 4 час. - ночной отдых.
В целях нормализации терморегуляции в жаркие месяцы стрижку баранов-производителей необходимо провести не позднее, чем за 2 месяца до начала их использования.
2.6. С целью более ранней проверки по качеству потомства от 8-10-месячных баранчиков допускается получение за сезон не более 10-15 эякулятов: 1,5-летних баранов надо использовать с нагрузкой не более 4 садок в неделю.

3. СОДЕРЖАНИЕ ХРЯКОВ

3.1. Хряков содержат в индивидуальных или групповых станках. Групповое содержание значительно облегчает уход за хряками и предупреждает развитие у них злого нрава. Станки для содержания хряков-производителей изготавливают из металлических труб. Это дает возможность животным контактировать и облегчает организацию моциона.
Помещения для хряков должны быть сухими, хорошо вентилируемыми и освещенными в дневное время суток. При использовании искусственного освещения необходимо соблюдать фотопериодизм: 8-10 часов продолжительность светлой части суток, остальное - темная часть.
3.2. Хрякам ежедневно, кроме ненастных дней, предоставляют групповой активный моцион на расстояние 2-3 км. Для предотвращения драк между хряками обязательно удаление клыков по мере их отрастания.
В летний период хряков-производителей содержат в лагерях с использованием пастбищ из многолетних бобовых трав. Особое внимание уделяют своевременной расчистке и обрезке копыт.
3.3. Хряков начинают использовать с 8-10-месячного возраста, когда они достигают живой массы 120-150 кг, но к чучелу приучают раньше, с 5-б-месячного возраста предоставляют периодические садки на чучело 1 раз в 7-10 дней. От приученных молодых хряков получают ло 1 эякуляту через 5-6 дней, от взрослых хряков сперму берут 1 раз в 2-3 дня. Сперму следует брать через 1-2 часа после кормления. При необходимости можно допускать более интенсивное использование хряков. В этом случае сперму у них берут через день с предоставлением отдыха на 7-8 дней через месяц использования.

4. СОДЕРЖАНИЕ ЖЕРЕБЦОВ

4.1. Жеребцов содержат в просторных светлых денниках без привязи. Размер денника - 16-18 м. Полы в деннике глинобитные, хорошо утрамбованные, с уклоном в сторону входа. В денниках должна быть всегда сухая соломенная подстилка. Помещение для жеребцов должно быть сухим, с хорошей вентиляцией и без сквозняков, Для скармливания концентрированных, сочных и грубых кормов в денниках оборудованы кормушки.
4.2. В летнее время жеребцов содержат в левадах со злаково-бобовым травостоем, площадью не менее I га на животное. Время пребывания жеребцов на свежем воздухе в левадах должно быть не менее 2-3 часов в сутки, в пастбищный период большую часть светового дня. Только в холодную, ненастную по году или сильную жару жеребцов на прогулку не выпускают.
4.3. Прогулки нервных, постоянно двигающихся по леваде печными аллюрами животных в первые дни их пребывания на свежем воздухе ограничивают до 30 минут в сутки, постепенно увеличивая время их нахождения в леваде до 1 часа и более. При ежедневном выпуске в леваду такие животные обычно постепенно успокаиваются и через 2-3 недели ведут себя нормально.
4.4. Ежедневный активный моцион - важнейшее условие длительного сохранения здоровья и воспроизводительной способности производителей.
4.5. Наряду со свободным моционом в левадах жеребцам-производителям обеспечивают принудительный моцион посредством их ежедневной (кроме выходных и праздничных дней) проездки на расстояние от 7 до 12 км. Дистанция проездки корректируется в зависимости от возраста и состояния здоровья жеребца.
4.6. Производителейнадо постоянно содержать чистыми не только в целях профилактики заболеваний, но и для уменьшения за1ряз ценности спермы пылью и микроорганизмами. Перед взятием спермы грязные места промывают теплой (18-..30°С) водой с мылом.
4.7. Жеребцов ежедневно чистят: в хорошую погоду на свежем воздухе, а в плохую - на конюшне, при этом грязные места замывают теплой водой. В теплое время года жеребца в течение 10-15 минут купают в реке или в большом пруду. Если нет водоема, надо купать производителей под душем при температуре воды 18...30°С. Копыта ежедневно очищают деревянным копытным крючком от грязи и примерно раз в месяц расчищают и обрезают копытным ножом.
4.8. С целью рационального использования жеребцов на пунктах по замораживанию спермы должен быть определен порядок (график использования) с указанием, в какие дни и часы получают сперму от того или иного жеребца, так как производители особенно чувствительны к нарушению режима использования.
4.9. Для замораживания сперму получают от жеребцов 2-3 раза в неделю. Более интенсивное использование приводит к половое истощению производителей и отрицательно отражается на качестве криоконсервированной спермы.
4.10. Молодым жеребцам (3-летнего возраста) и жеребцам старше 15 лет на1рузку устанавливают в зависимости от состояния здоровья, половой потенции и качества получаемой спермы.
4.11. При искусственном осеменении свежеполученной или сохраненной при 2...4°С спермой нормальной нагрузкой для жеребца следует считать одну садку в день при одном дне отдыха в неделю.
4.12. Резкие окрики и побои, особенно в манеже, болевые ощущения, возникающие при неправильной подготовке искусственной вагины, нарушения в технике взятия спермы нередко приводят к возникновению у производителей оборонительных рефлексов по отношению к скотнику или технику. Поэтому нужно строго соблюдать правила подготовки искусственной вагины. В ней необходимо создавать требуемую температуру, давление и скольжение. Во время взятия спермы нельзя причинять животному боль резкими движениями искусственной вагины в сторону; не снимать ее с полового члена после эякуляции до тех пор, пока производитель не станет передними конечностями на пол. Направляя пенис в искусственную ватину, нужно следить за тем, чтобы не нанести травмы жестким краем ее корпуса.
4.13. Кормление жеребцов и уход за ними проводят по следующему примерному распорядку дня в зимнее время
- 5 час. - 6 час- водопой, кормление (концентраты, сочные корма, сено), уборка денников;
- 6 час. - 7 час. - чистка жеребцов;
- 7 час. - 8 час, - взятие спермы;
- 8 час. - 10 час. - принудительный моцион;
- 10 час. - 12 час. - отдых в деннике;
- 12 час. - 13 час. - водопой, кормление (концентраты, подкормки, сено);
- 13 час. - 16 час. - прогулка в леваде или в плохую погоду отдых в деннике;
- 16 час. - 19 час. - отдых в деннике, кормление сеном;
- 19 час. - 19 час. 30 мин. - водопой, кормление (концентраты, подкормки);
- 20 час, - дача сена на ночь;
в летнее время:
- 5 час. - 6 час. - водопой, кормление (концентраты, сено), уборка денников;
- 6 час. - 7 час. - чистка жеребцов;
- 7 час, - 8 час. - взятие спермы;
- 8 час. - 10 час. - принудительный моцион;
- 10 час. - 12 час. - отдых в деннике, кормление свежескошенной травой;
- 12 час. - !3 час. - водопой, кормление (концентраты, подкормки);
- 13 час- - 16 час. - отдых в деннике, кормление сеном;
- 16 час. - 19 час. - прогулка в леваде или в плохую погоду -отдых в деннике;
- 19 час- - 19 час. 30 мин. - водопой, кормление (концентраты, подкормки);
- 20 час. - дача сена на ночь.

5. СОДЕРЖАНИЕ КОЗЛОВ

5.1. Содержат козлов-производителей летом на хороших пастбищах, в период получения спермы - под навесами или в просторных помещениях при обязательной пастьбе утром и вечером и регулярном водопое.
5.2. Распорядок дня состоит из обязательного моциона утром и вечером, взятия спермы 2 раза в день. На ночь раздают сено и концентраты.
5.3. Половые рефлексы у козлов-производителей наиболее активно проявляются в период с августа по декабрь. В зимние месяцы половая активность снижается, а качество спермы ухудшается.
5.4. Накопление запасов замороженной спермы следует начинать за 1,5-2 месяца до случного сезона.

Взятие спермы

1. ВЗЯТИЕ СПЕРМЫ У БЫКА

1.1. Сперму у производителей берут в искусственную вагину, в которой создаются условия, необходимые для проявления рефлекса эякуляции (давление, температура и скольжение), Вагина состоит из цилиндра с патрубком для налива воды и нагнетания воздуха, резиновой трубки (камеры) и прижимных резиновых колец.
1.2. Искусственную вагину для взятия спермы у производителей готовят в такой последовательности:
- на конец цилиндра, противоположный месту крепления спермоприемника, надевается манжета из губчатой резины для предупреждения травматизма и повышения качества спермы, а затем резиновая камера;
- тщательно вымытую и высушенную резиновую трубку (камеру) вкладывают в цилиндр и натягивают ее на края цилиндра до устранения складок и свободного ее провисания- Поверх отвернутых краев камеры надевают прижимные резиновые кольца;
- в межстенное пространство стерильной искусственной вагины наливают (в зависимости от размера) 150-500 см3 горячей воды (55...60°С) и присоединяют стерильный спермоприемник;
- перед использованием внутренний просвет искусственной вагины равномерно обрабатывают синтетической средой при помоши стерильной стеклянной палочки или металлического шпателя.
1.3. В подготовленную искусственную вагину посредством компрессора нагнетают воздух до смыкания стенок резиновой трубки на всем протяжении. Давление в ватине должно быть 40-60 мм ртутного столба.
1.4. Непосредственно перед взятием спермы в искусственной вагине измеряют температуру. Она должна быть в пределах 40...42°С.
1.5. Сперму у быков берут в манеже через 2 часа после кормления в заранее установленное время на укороченную искусственную вагину с одноразовым спермоприемником. При этом пользуются механическим станком. Допускается также взятие спермы при садке быка на любое здоровое животное (вол, бык), соответствующее быку-производителю по росту.
1.6. Перед садкой производителя с помощью палки-водила подводят к станку (манекену) н удерживают 3-5 минут. Во время садки быка на манекен искусственную вагину держат под углом 40...45°.
1.7. После выделения производителем спермы искусственную ватину поворачивают в горизонтальное положение и герметизируют взятый эякулят путем термической сварки с помощью прибора типа "Молния-1". Затем отрезают спермоприемник с эякулятом, а стеклянный спермоприемник закрывают крышкой, прикрепляют к ним этикетку и передают через стерильный шлюз в лабораторию.
1.8. Для получения более полноценных эякулятов большинству быков целесообразно дать возможность сделать 1-2 холостых (без выделения спермы в искусственную вагину) прыжка на станок, либо выдержать несколько минут перед механическим станком (в зависимости от темперамента). В промежутке между взятием первого и второго эякулята быка водят по специальной площадке в течение 10-20 минут.
1.9. Для предупреждения у быков тормозных рефлексов меняют манекены и место взятия спермы, применяют холостые приводы, массаж семенников, а также выдерживают производителей в манеже при взятии спермы у быков, энергично делающих садки.

2. ВЗЯТИЕ СПЕРМЫ У БАРАНА И КОЗЛА

2.1. При приучении баранов на искусственную вагину сперму у них берут только на овец в охоте, затем постепенно приучают делать садки на овец вне охоты, валухов и других баранов, Садка у барана происходит очень быстро.
2.2. Техник садится на корточки с правой стороны от животного в станке и держит искусственную вагину (на уровне таза овцы под углом 35° спермоприемником вверх, придерживая его указательным пальцем). На эякуляцию указываег характерный толчок вперед, после чего баран соскакивает с животного.
2.3. После взятия спермы искусственную вагину поворачивают спермоприемником вниз, чтобы в него стекла сперма, открывают краник и проводят остальные приемы, как при взятии спермы у быка.

3. ВЗЯТИЕ СПЕРМЫ У ХРЯКА

3.1. Для взятия спермы у хряков применяют те же искусственные вагины, что и для быка, с соединительной муфтой для спермоприемника. Для взятия спермы у хряков применяют чучела разной конструкции. Сзади чучела, прикрепленного к полу, кладут рифленые или резиновые коврики.
3.2. Чтобы приучить хряка делать садки на чучело, ему сначала дают покрыть в манеже несколько маток. Если хряк не делает садок и после этого, чучело следует обтянуть шкурой свиньи. После выработки у хряка положительных условных рефлексов шкуру с чучела снимают.
3.3. Садка у хряков продолжается 5-10 минут. Поэтому при взятии спермы искусственную ватину надо прочно зафиксировать в чучеле и обеспечить в ней сохранение во время садки необходимых условий (давление, скольжение, температура). Для поддержания нужной температуры в ватине в чучеле устанавливают электрическую лампочку или электрообогреватель с терморегулятором.
3.4. При взятии спермы от хряков на входное отверстие искусственной вагины прикрепляют резиновым кольцом эластичную стерильную полиэтиленовую пленку с надрезами на ней и слегка смазывают стерильным вазелином или синтетической средой.
В качестве спермоприемника используют стерильную стеклянную банку емкостью 0,5-0,8 л; употребляются и полиэтиленовые спермоприемники одноразового использования с поролоновым утеплителем. Искусственную ватину со спермоприемником вставляют в чучело так, чтобы входные отверстия ее и станка точно совпадали.
3.5. При входе в манеж хряк обнюхивает чучело, а затем делает садку. В это время, при необходимости, можно направлять рукой (через кожу препуция) пенис хряка в искусственную вагину. На эякуляцию указывают следующие признаки: хряк успокаивается и прекращает совокупительные движения, хвост закручивается вверх и становится неподвижным, заметны ритмичные сокращения ануса. В конце эякуляции наблюдаются ритмичные движения хвоста, после чего он опускается.

4. ВЗЯТИЕ СПЕРМЫ У ЖЕРЕБЦА

4.1. Сперму у жеребцов берут на специальную искусственную ватину, состоящую из алюминиевого цилиндра, соединенного конусным переходником с коротким цилиндром меньшего размера, на который надевается спермоприемник. В большинстве случаев жеребцы нормально проявляют рефлекс эякуляции при использовании для взятия спермы искусственной вагины. Однако примерно от 10-15% жеребцов получить сперму на искусственную ватину не удается, в этом случае рекомендуем применить спермособиратель Гайдабурова (презерватив для жеребцов).
4.2. Для взятия спермы с помощью искусственной вагины жеребец должен сделать садку на кобылу в охоте или на специально приученную кобылу спокойного нрава (кобылу-подставку). С целью фиксации задних конечностей на кобылу надевают случную шлею-путы, хвост (репицу) обертывают специальным полиэтиленовым чехлом одноразового применения, либо обматывают чистым бинтом. Наружные половые органы кобылы-подставки тщательно обмывают теплой водой.
4.3. При систематическом получении спермы от жеребца для искусственного осеменения возможно приучение его к садкам на специальный станок (чучело). При этом получение спермы может быть проведено в более безопасных и более благоприятных ветеринарно-санитарных условиях.
4.4. Для приучения жеребцов к садкам на чучело необходимо терпение и определенные навыки обслуживающего персонала. Приучить жеребцов к садкам на чучело при их одновременном использовании в естественной случке сложно. Чтобы не нарушать стереотип сексуального поведения жеребцов при двойном варианте племенного использования (в естественной случке и для искусственного осеменения) рекомендуем от приучения к садкам на чучело отказаться.
4.5. Остов искусственной вагины представляет собой металлический цилиндр специальной конструкции, на который надевают (натягивают) резиновую камеру. Шероховатая поверхность этой камеры должна прилегать к металлической поверхности остова, а гладкая - наружу.
4.6. Концы резиновой камеры должны быть завернуты на края остова. В межстенное пространство через патрубок заливают 2,0-3,5 литра воды. Количество заливаемой воды варьируют в зависимости от размеров полового члена жеребца. К моменту взятия температураводы в ватине должна быть в пределах 40...42°С. На узкий конец вагины надевают стерильный спермо-приемник с утеплителем. Внутреннюю поверхность собранной вагины тщательно смазывают стерильным очищенным вазелином.
4.7.Техник при взятии спермы от жеребцов с помощью искусственной вагины должен находиться с правой стороны. Во время садки жеребца искусственную ватину удерживают у тела кобылы и плотно прижимают к ее крупу спермоприемником вверх под углом 30-35°. В момент эякуляции ватину постепенно по мере ослабления эрекции пениса жеребца опускают спермоприемником вниз с целью предупреждения вытекания эякулята из вагины.
4.8. После взятия спермы спермоприемник снимают с вагины, накрывают стерильной салфеткой и переносят в помещение лаборатории. Сперму немедленно фильтруют через стерильную марлевую салфетку (1-2 слоя) в предварительно подогретую до 25...30°С градуированную мензурку и накрывают ее чашкой Петри, Оставшийся на марле густой тягучий секрет придаточных половых желез выбрасывают.
4.9. Получение спермы жеребцов при помощи спермособирателя Гайдабурова.
Спермособиратель Гайдабурова представляет собой латексный мешок, напоминающий по своей конструкции медицинский презерватив, но больших размеров.
При получении спермы с помощью презерватива используют только кобылу в охоте.
При взятии спермы с помощью спермособирателя Гайдабурова последовательность работ следующая:
- латексный мешок свертывают и помещают в чашку Петри. Затем чашку Петри со спермособирателем стерилизуют в сушильном шкафу при температуре не выше 100°С в течение I часа;
- при взятии спермы техник располагается с правой стороны кобылы и во время садки жеребца надевает на пенис спермособиратель;
- жеребцу с надетым спермособирателем разрешают произвести нормальную садку на кобылу. После эякуляции во время схода жеребца с кобылы спермособиратель снимают. Дальнейшая обработка эякулята аналогична обработке эякулята, полученного с помощью искусственной вагины.

Качество спермы. Оттаивание и оценка криоконсервированного семени

1. ОБЩИЕ ПОКАЗАТЕЛИ

1.1. Каждый полученный эякулят предварительно оценивают визуально, устанавливая при этом, нет ли в сперме примеси гноя, крови, мочи или хлопьев (наличие последних указывает на воспалительный процесс в придаточных половых железах). Сперма с такими примесями к использованию не допускается.
После предварительной оценки измеряют объем эякулята и определяют концентрацию и подвижность сперматозоидов.
1.2. Объем эякулятабыка и барана измеряют посредством смесителя, градуированного спермоприеыника, пробирки или пипетки, а объем эякулята жеребцаи хряка - мензуркой.
Объем эякулята в одноразовом полиэтиленовом спермоприемнике можно определять взвешиванием на точных весах типа ВЛК-20, ВЛК-500 или Р-2-200, зная заранее стандартную массу отсоединенной части спермоприемника (1 г спермы соответствует 1 см3).
1.3. Для оценки спермы по подвижности применяют микроскоп с нагревательным столиком (столик Морозова или столик Пакенаса), который позволяет автоматически поддерживать температуру 38...40°С. Для оценки подвижности сперматозоидов на предметное стекло, лежащее на нагревательном столике, наносят каплю спермы и каплю 2,9% раствора цитрата натрия, смешивают, накрывают покровным стеклом и оценивают при увеличении микроскопа в 120-200 раз.
Для качественной оценки необходимо правильно настроить освещение поля зрения микроскопа (приложение 7).
Подвижность сперматозоидов определяют по 10-балльной шкале в нескольких полях зрения. Высшую оценку (10 баллов) получает сперма, в которой практически все (100%) сперматозоиды имеют прямолинейно-поступательное движение (ППД). При оценке 9 баллов примерно 9 сперматозоидов из каждых 10 (то есть 90%) имеют ППД и т.д. Другие виды движения сперматозоидов (манежное, колебательное) при оценке спермы по балльной системе не учитывают.
1.4. В зависимости от концентрации сперматозоидов неразбавленная сперма имеет следующие оценки: густая (Г), средняя (С) и редкая (Р).
Сперма густая. Густая сперма быка содержит сперматозоидов свыше 1 млрд/см3, барана - 2 млрд/ см , хряка - 0,2 млрд/ см3, жеребца - 0,25 млрд/ см3.
Сперма средняя. Средняя сперма быка содержит сперматозоидов от 0,7 до 1 млрд/см3, барана от 1 до 2 млрд/ см , хряка от 0,1 до 0,2 млрд/ см3, жеребца от 0,15 до 0,25 млрд/ см3.
Сперма редкая. Редкая сперма быка содержит сперматозоидов менее 0.7 млрд/ см , барана менее 1 млрд/ см3, хряка менее 0,1 млрд/ см , жеребцаменее 0,15 млрд/ см .
К использованию допускается сперма быков, баранов, хряков и.жеребцов с оценкой густая и средняя.
1.5. Густоту спермы и подвижность обозначают двумя знаками, Например, Г-9, что означает сперма густая, имеет 90% подвижных, с прямолинейно-поступательным движением сперматозоидов.
1.6. Концентрацию сперматозоидов определяют при помощи счетных камер, фотоэлектроколориметра и оптических стандартов (приложение 8).
1.7. При снижении качественных показателей спермы у отдельных производителей подсчитывают патологические формы сперматозоидов, определяют рН, физиологическую резистентность и интенсивность окислительно-восстановительных процессов по существующим методикам.
1.8. При хранении спермы при плюсовых температурах для биологического контроля оставляют от каждого разбавленного эякулята быка 0,5-1 см3, барана - до 0,5 см3, хряка - 10 см3, жеребца 3-5 см3 и исследуют в течение 3 дней. Результаты оценки записывают в лабораторный журнал.

2. ОТТАИВАНИЕ И ОЦЕНКА КРИОКОНСЕРВИРОВАННОЙ СПЕРМЫ БЫКА

2.1. Оттаивание и оценка спермы быка, замороженной в соломинках.
Сперму в соломинках оттаивают с использованием биологических термостатов-оттаивателей. Соломинку обтирают марлевой салфеткой и, держа за конец, встряхивают, чтобы воздушный пузырек опустился к пробке. Острыми ножницами отрезают пробку с одного конца соломинки, опускают во флакон или ампулу с 1 см3 2,9% раствора натрия цитрата нейтрализованного, отрезают второй конец соломинки. После перемешивания каплю разбавленной спермы наносят на предметное стекло, накрывают покровным стеклом и оценивают по подвижности (пункт 1.3).

2.2. Оттаивание и оценка спермы быка, замороженной в облицованных гранулах.
Обойму с тубами поднимают стержнем-держателем на уровень жидкого азота, открывают пробки и из каждого контейнера отбирают пинцетом с плоскими браншами по одной грануле, которые быстро оттаивают в биологическом термостате.
Поверхность пленочной оболочки гранулы с оттаянной спермой вытирают стерильной салфеткой, вскрывают ножницами и определяют подвижность под микроскопом. При использовании оптически прозрачной пленки гранулы не вскрывают, а оценивают сперму под микроскопом через прозрачную стенку.

2.3. Оттаивание и оценка спермы быка, замороженной в открытых гранулах.
Одну гранулу (дозу) помещают во флакон или ампулу с 1 см3 2,9% раствора натрия цитрата нейтрализованного, предварительно помещенные для оттаивания семени в термостат-оттаиватель, ставят на стол при температуре 18...20°С. Категорически запрещается оттаивать гранулы при комнатной температуре. Оттаянную сперму оценивают по подвижности (пункт 1.3).
Замороженная сперма быка после ее оттаивания должна соответствовать требованиям действующего ГОСТа на сперму.
Биологические исследования замороженной спермы быков проводят дважды: через 24 часа после замораживания и при передаче в стационарное хранилище (банк спермы). Сперму отправляют в хозяйство не ранее, чем через 30 дней карантинного срока.

Криоконсервация семени. Хранение замороженного семени быков производителей

1. ОСНОВНЫЕ ПОЛОЖЕНИЯ

1.1. Для длительного хранения спермы производителей применяют метод глубокого замораживания в жидком азоте (до температуры -196°С). Метод длительного хранения спермы требует соблюдения следующих условий:
- точного выполнения этапов технологии замораживания спермы;
- непрерывного поддержания температуры -196°С в течение всего срока хранения спермы. Оттаивание и повторное замораживание, а также колебания температуры во время хранения замороженной спермы не допускаются.
1.2. Сперма производителей хранится в спермобанке. Сроки хранения замороженной спермы определяются целями ее использования.
1.3. Длительное хранение замороженной спермы производителей в жидком азоте осуществляется в специальных хранилищах или в стационарных емкостях.
В стационарных емкостях сперму хранят в тубах или пластмассовых стаканах, погруженных в жидкий азот. На тубах и стаканах должна быть нанесена информация с указанием даты взятия спермы, клички быка и количества доз.
1.4. Для перевозки спермы и хранения ее на пунктах искусственного осеменения а жидком азоте применяют сосуды Дьюара.

2. ЗАМОРАЖИВАНИЕ СПЕРМЫ БЫКА В ПОЛИПРОПИЛЕНОВЫХ СОЛОМИНКАХ

2.1. Для разбавления спермы быка применяют синтетическую ЛГЖ среду (табл. 12.1).
Таблица 12.1
ЛГЖ средаКомпоненты Количество
Лактоза, г 11,5
Полиген, г 0,03-0,06
Глицерин, см3 5,0
Желток куриных яиц, см3 20
Вода дистиллированная, см3 100

2.2. Для приготовления среды сухие заготовки вносят в стерильную колбу, добавляют необходимый объем прокипяченной дистиллированной воды (70...80°С), растворяют, охлаждают до 30...32°С и добавляют санирующий препарат, а затем глицерин и желток.
Технологическую обработку спермы (расфасовку, укупорку и раскладку в штативы) проводят при комнатной температуре.
2.3. В зависимости от подвижности и концентрации сперматозоидов сперму быка разбавляют в 20-50 и более раз (приложение 9) с таким расчетом, чтобы в одной дозе разбавленной спермы было не менее 15 млн, сперматозоидов с прямолинейно-поступательным движением.
2.4. После предварительной оценки сперму переливают в градуированный смеситель емкостью 100-200 см3 и измеряют объем. Разбавитель, подогретый до температуры 25...30°С, небольшими порциями вводят по стенке в емкость со спермой и осторожно перемешивают после добавления каждой порции.
Разбавленную сперму расфасовывают в стерильные полипропиленовые соломинки емкостью 0,25 см3.
2.5. На каждой соломинке делают надписи маркировочной машиной, указывающие наименование предприятия, кличку и инвентарный номер быка, а также дату взятия спермы, номер серии.
2.6. Для автоматического наполнения соломинок спермой и укупорки используют машину М6-МУ2-С. В цилиндр (мензурку) наливают разбавленную сперму, а специальное устройство наполняют стерильными стеклянными или металлическими шариками для укупорки. Соломинки укупоривают с обоих концов: один шарик служит в качестве пробки-поршня, другой - герметизирующей пробкой.
2.7. После наполнения соломинок между спермой и одним из шариков остается воздушный пузырек длиной 8-18 мм. Чтобы воспрепятствовать попаданию жидкого азота внутрь соломинок во время замораживания и хранения, пузырек перемещают в середину соломинки путем энергичного встряхивания.
2.8. Соломинки устанавливают на штативы с помощью счетных реек. На счетную рейку накладывают штатив и легким движением ладони быстро заполняют соломинками. После этого штатив с соломинками снимают с рейки и помешают в холодильник.
2.9. Штативы выдерживают в холодильнике 3-4 часа при 2...4°С.
2.10. Замораживают сперму в стационарном хранилище типа КВ-6202 или ХБ-0,5 в газообразном азоте при температуре -150± 20°С, на щите из нержавеющего металла толщиной 1,5-2 мм. Одновременно замораживают до 750 спермодоз. Цикл замораживания продолжается 7минут.
Уровень жидкого азота при замораживании с обдувом необходимо поддерживать на расстоянии 6-8 см до щита замораживающего устройства. При замораживании спермы без обдува щит замораживающего устройства должен касаться поверхности жидкого азота. При этом штативы с соломинками располагают в один ряд. Изменение температуры спермы и испаряющегося газообразного азота контролируют самопишущим потенциометром КСП-4 с подключенными медно-константановыми термопарами.
2.11. После замораживания соломинки со спермой помещают в пластмассовые стаканы или тубы, предварительно наполненные жидким азотом. Для сбора соломинок используют специальный собиратель с деревянной рукояткой. Его металлическую часть охлаждают в жидком азоте, затем вставляют в штатив, осторожно проводят вдоль него, в результате чего все соломинки ссыпаются в собиратель. После этого соломинки поворачивают и перекладывают в пластмассовые стаканы для хранения в стационарном хранилище.
2.12. Хранят замороженную сперму в стационарных хранилищах типа КВ-6202, ХБ-0.5 или ХБ-0,2 в пластмассовых стаканах, полностью погруженных в жидкий азот. Канистры с поднимателем стаканов заранее должны быть помещены в хранилище.

Учет технологических процессов

1. Учет технологических процессов в организациях по искусственному осеменению и/или по трансплантации эмбрионов сельскохозяйственных животных осуществляется в соответствии с Федеральным законом "О племенном животноводстве".
Учет должен быть простым, но точно отражающим производственную деятельность и дающим возможность оперативно контролировать работу организаций.
2. Рекомендуется использовать следующие формы учета:
- журнал учета использования производителя и показателей его спермопродукции;
- лабораторный журнал учета качества спермы производителя за период его использования (с приложением ведомостей на отправку спермы в хозяйства зоны);
- ордер на отправку спермы производителя;
- график доставки спермы производителя на пункты искусственного осеменения;
ведомость учета использования спермы производителя в организации по искусственному осеменению животных;
результаты проверки оплодотворяемоста коров и телок при искусственном осеменении спермой производителей, принадлежащих организации;
- сводная информация о результатах искусственного осеменения сельскохозяйственных животных спермой производителей, принадлежащих организации (данная информация представляется хозяйством (пунктом) обслуживающей организации один раз в год);
- журнал извлечения, оценки качества и использования эмбрионов (приложение 13);
- журнал криоконсервации и использования эмбрионов (приложение14).
3. Для индивидуального учета на каждого производителя и/или донора необходимо иметь:
- фотографию животного;
- племенное свидетельство или карточку (1-мол или 2-мол);
- ветеринарный паспорт.
4. Результаты анализов кормов, воды, крови, смывов с препуциального мешка и др.

Приложение: Работа с микроскопом

Современный микроскоп - это точный оптический прибор, требующий строгого соблюдения правил работы с ним.
Хранить микроскоп нужно закрытым от пыли (под чехлом, колпаком или в специальном футляре). Время от времени следует проверять чистоту и состояние оптики и протирать ее, но только снаружи. Для чистки нужно использовать волосяную кисточку или мягкую тряпочку. Не рекомендуется применять для этих целей вату или марлю, так как они оставляют после себя волокна и нити. Кисть или тряпочку можно смочить Водой или спиртом. Нельзя применять для чистки оптики бензин или ксилол, так как попадание их внутрь объектива может привести к расклеиванию линз и помутнению оптики. Механически трущиеся части можно протереть бензином или толуолом, а затем смазать маслом или специальной консистентной смазкой.

Хорошее освещение достигается при установке света по методу Келлера. Для этого устанавливают осветитель так, чтобы, перемещая патрон лампочки в осветителе или весь осветитель, добиться четкого изображения нити накала лампочки на полностью закрытой диафрагме конденсора так, чтобы это изображение полностью заполняло отверстие конденсора. Закрыв диафрагму осветителя, открывают диафрагму конденсора и, перемещая конденсор, добиваются резкого изображения диафрагмы осветителя в поле зрения микроскопа. Чтобы яркий свет не слепил глаза, предварительно уменьшают яркость накала лампы осветителя. С помощью зеркала изображение диафрагмы конденсора устанавливают в центре поля зрения, а диафрагму осветителя открывают так, чтобы было освещено все видимое поле зрения. Больше раскрывать диафрагму не надо, так как это не усилит освещенности, а лишь уменьшит контрастность за счет рассеивания света.

Перечень необходимого оборудования, инструментов, препаратов и сред в организации по трансплантации эмбрионов сельскохозяйственных животных центра трансплантации

Фетальная сыворотка теленка
Бычий сывороточный альбумин (БСА)
Среда Дюьбекко (фосфатно-солевой буфер)
Новокаин (2%)
Простагландины (ПГФ2)
Маточный релаксант
Фолликулостимулирующий гормон (ФСГ)
Антибиотики/антимикотики
Спирт-ректификат
Глицерин (ч.д.а. или х.ч.)
Сахароза (ч.д.а. или х.ч.)
Вода дистиллированная
Раствор трипсина (0,25%)
Витамины, лекарственные препараты
Комплект оборудования для извлечения эмбрионов
Расширитель шейки матки
Комплект инструментов для пересадки эмбрионов
Санитарные чехлы
Пайеты (0,25 см3)
Чашки Петри (=90 мм, =35...40 мм)
Перчатки одноразовые для ректального исследования
Настольный термостат или водяная баня для оттаивания эмбрионов
Микропипетки или венозный катетер
Мембранные фильтры-насадки для стерилизации сред ( пор=0,22 мкм)
Фильтры для эмбрионов
Шприцы (35...60 см3, 10 см3, 5 см3, 2 см3, 1 см3)
Иглы инъекционные
Пинцеты
Ножницы большие и малые
Термометр
Стереомикроскоп (МБС-10 или аналогичный)
Замораживатель эмбрионов (ЭМБИ-К или ЗЭМ)
Чемодан-укладка для переноса инструментов
Автоматическая пипетка-дозатор (1 см3) или пипетки мерные градуированные
Маркер
Бумажные фильтры
Фильтровальная бумага
Пенопластовая ванна (4 – 5 л)
Вата
Лабораторная посуда
Журналы первичного учета

Список используемой литературы.

• Ветеринарное акушерство, гинекология и биотехника размножения / А. П. Студенцов, В. С. Шипилов, В. Я. Никитин и др.: Под ред. В. Я. Никитина и М. Г. Миролюбова. 7-е изд., перераб. и доп. М. : Колос, 1999. 495 с.

• Ветеринарное акушерство и гинекология / А. П. Студенцов, В. С. Шипилов, Л. Г. Субботина, О. Н. Преображенский; Под ред. В. С. Шипилова. – 6-е изд., испр. и доп. М.: Агропромиздат, 1986. – 480 с.

• Практикум по акушерству, гинекологии и искусственному осеменению сельскохозяйственных животных / В. С. Шипилов и др. М. : Агропромиздат, 1988. 335 с.

• Акушерство, гинекология и биотехника размножения животных: Методические указания для студентов IV курса факультета ветеринарной медицины / Сост. В. С. Авдеенко, В. Г. Гавриш, А.М. Семиволос; ФГОУ ВПО “Саратовский ГАУ”. Саратов, 2002. 100 с.

• Министерство сельского хозяйства Российской Федерации, Департамент животноводства и племенного дела. "Искусственное осеменение коров и телок. Инструкция."